Cómo elegir un sistema de cromatografía: Guía del comprador de FPLC y AKTA para laboratorios de purificación de proteínas

Los sistemas de cromatografía FPLC y AKTA son la plataforma estándar para la purificación automatizada de proteínas en laboratorios de investigación, biotecnología y biofarmacéuticos. La selección del sistema adecuado requiere comprender la escala de purificación, la química de la columna y los requisitos de software. Esta guía cubre los puntos clave de decisión para los laboratorios que adquieren sistemas de cromatografía.

¿Qué es FPLC?

La cromatografía líquida rápida de proteínas (FPLC) es una técnica de cromatografía líquida de baja presión optimizada para la purificación de proteínas. A diferencia de la HPLC, que opera a altas presiones con columnas de partículas pequeñas, la FPLC utiliza resinas de partículas más grandes a presiones más bajas para preservar la actividad y la estructura de las proteínas. AKTA es el nombre de la marca de la línea de sistemas FPLC de Cytiva (anteriormente GE Healthcare), que se ha convertido en el estándar de la industria en laboratorios de investigación y biofarmacéuticos.

Modos de Purificación Clave

La cromatografía de afinidad utilizando resinas His-tag, GST o Proteína A/G es típicamente el primer paso en la purificación de proteínas recombinantes o anticuerpos, proporcionando alta selectividad y eficiencia de captura. La cromatografía de intercambio iónico separa proteínas en función de la carga y se utiliza para la purificación intermedia y el pulido. La cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) separa por tamaño molecular y se utiliza para el pulido final y el intercambio de tampones. La mayoría de los flujos de trabajo de purificación combinan dos o más de estos modos en secuencia.

Escala del Sistema y Caudal

Haga coincidir el rango de caudal del sistema con las dimensiones de su columna y la escala del proceso. La purificación a escala de banco de cantidades de miligramos de proteína generalmente utiliza columnas con volúmenes de lecho de 1-5 mL a caudales de 1-5 mL/min. La purificación a escala piloto de cantidades de gramos requiere columnas más grandes y caudales de 10-100 mL/min o más. Confirme que el rango de caudal de la bomba del sistema cubra su escala actual y la anticipada.

Configuración del Detector

La absorbancia UV a 280 nm es el detector estándar para el monitoreo de proteínas. La detección de conductividad es esencial para monitorear gradientes salinos en cromatografía de intercambio iónico. El monitoreo de pH es útil para el desarrollo de gradientes y las transiciones de tampón. Confirme que la configuración del detector coincide con los requisitos de su flujo de trabajo de purificación.

Software: UNICORN y Alternativas

El software UNICORN de Cytiva es el estándar de la industria para el control del sistema AKTA y el desarrollo de métodos. Confirme la versión del software y el estado de la licencia al comprar sistemas AKTA reacondicionados, ya que las versiones anteriores de UNICORN pueden no ser compatibles con los sistemas operativos actuales. Los sistemas NGC de Bio-Rad utilizan el software BioLogic, que ofrece una interfaz más accesible para laboratorios nuevos en cromatografía automatizada.

Sistemas AKTA Nuevos vs. Reacondicionados

Los sistemas AKTA reacondicionados de Cytiva están ampliamente disponibles y pueden ofrecer ahorros significativos en comparación con los instrumentos nuevos. Las comprobaciones clave incluyen la clasificación de presión de la bomba y la condición del sello, la vida útil de la lámpara del detector UV y la precisión de la absorbancia, la función de la válvula y del colector de fracciones, y el estado de la licencia del software. Confirme que la clasificación de presión del sistema sea compatible con la química de su columna antes de comprar.

Adquiera Sistemas de Cromatografía en mLab Supply

mLab Supply suministra sistemas de cromatografía FPLC y AKTA nuevos, reacondicionados y excedentes de Cytiva, Bio-Rad y Repligen para laboratorios de investigación, biotecnología y biofarmacéuticos. Envíe una solicitud de presupuesto y confirmaremos la disponibilidad actual, la configuración del detector y el estado de la licencia del software en un plazo de 1 a 2 días hábiles.

Explorar Sistemas de Cromatografía | Solicitar un Presupuesto

Preguntas Frecuentes – Guía del Comprador de Cromatografía FPLC y AKTA

¿Cuál es la diferencia entre AKTA Pure, AKTA Start y AKTA Avant?

AKTA Start es un sistema de nivel de entrada para purificación básica por afinidad y exclusión por tamaño a caudales bajos. AKTA Pure es la plataforma de investigación estándar con capacidad de gradiente completa y una amplia gama de opciones de columna y detector. AKTA Avant es un sistema de mayor caudal a escala piloto para volúmenes de purificación más grandes. Haga coincidir el sistema con su escala de purificación y los requisitos de química de la columna.

¿Qué versión de software UNICORN necesito para mi sistema operativo?

UNICORN 7 y versiones posteriores son compatibles con Windows 10. Las versiones anteriores de UNICORN (5.x, 6.x) pueden no ser compatibles con los sistemas operativos actuales. Al comprar un sistema AKTA reacondicionado, confirme la versión de UNICORN incluida y el tipo de licencia antes de comprar.

¿Puedo realizar cromatografía de intercambio iónico y exclusión por tamaño en el mismo sistema AKTA?

Sí. La mayoría de los sistemas AKTA admiten múltiples modos de cromatografía cambiando columnas y tampones. Confirme que la clasificación de presión del sistema sea compatible con la química de su columna y que la configuración del detector incluya monitoreo de conductividad para el desarrollo de gradientes de intercambio iónico.

¿Puede mLab Supply conseguir sistemas AKTA con configuraciones específicas de detector y software?

Sí. Envíe una solicitud de presupuesto especificando su modelo AKTA requerido, configuración del detector, versión de UNICORN y escala de purificación y confirmaremos las opciones disponibles y el tiempo de entrega.